牛奶中氟苯尼考檢測的固相萃取方法
（Polyclean X-HLB）
一、實驗?zāi)康?/span>
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，HPLC 作為分析方法，檢測牛奶樣品中的氟苯尼考?xì)埩羲健Ｔ摲椒ú僮骱啽悖珊喕瘶悠非疤幚磉^程，減少有機溶劑的使用。
二、實驗?zāi)繕?biāo)物
氟苯尼考（CAS: 73231-34-2） 三、應(yīng)用范圍
本方法適用于牛奶中氟苯尼考的檢測的HPLC 檢測及確證。四、實驗材料
NuAnalytical PolyClean X- HLB 固相萃取柱 60mg/3mL。五、實驗方法
1、 樣品待測溶液制備
準(zhǔn)確稱取牛奶 2 g（精確到 0.001 g），加入乙酸乙酯 15 mL，高速均質(zhì) 1 min，加入 5
g 無水硫酸鈉，渦旋振蕩 1min，搖床振蕩 10 min。4000 r/min 轉(zhuǎn)速離心 5 min。將上清液轉(zhuǎn)移至梨形瓶中，于 45 ℃旋蒸至近干，用 6mL 水溶解殘渣，5 mL×2 次正己烷除脂，棄去正己烷層，取 3 mL 水層待凈化。
2、活化
依次用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化
3、上樣和洗脫
將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中，以 2 mL/min 的流速過柱，棄去濾液，用 5 mL
水淋洗固相萃取柱，棄去淋洗液，抽干 5 min。用 5 mL 5%氨化甲醇洗脫固相萃取柱，收集洗脫液。
4、重新溶解
洗脫液于 45 ℃氮氣吹干，用 1 mL 甲醇定容，0.22 μm 微孔濾膜過濾，供高效液相色譜測定。
5、HPLC 條件
色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm, 5μm)
檢測器：UV@ 224 nm
流動相：A-水 B-乙腈
洗脫方式：等度洗脫 A:B=83 : 17
流速：1.0 mL/min 柱溫：30 ℃ 進樣量：20 μL
六、實驗結(jié)果
1、牛奶中氟苯尼考的 5 mg/kg 添加回收結(jié)果
表 1 牛奶中氟苯尼考的 5 mg/kg 添加回收結(jié)果
回收率（%）
名稱
平均回收率（%）
RSD（%）
1
2
3
氟苯尼考
112.34
109.23
111.84
111.14
1.50
2、添加水平為 5 mg/kg 牛奶中氟苯尼考?xì)埩粑锷V圖
圖 1 添加水平為 5 mg/kg 牛奶中氟苯尼考?xì)埩粑锷V圖
